کیت سنتز cDNA

42,550,000 ﷼

کیت سنتز cDNA (Complementary DNA Synthesis Kit) یک ابزار آزمایشگاهی ضروری در تحقیقات ژنتیک و زیست‌شناسی مولکولی است. این کیت برای تبدیل RNA پیام‌رسان (mRNA) به DNA مکمل (cDNA) استفاده می‌شود که مرحله‌ای کلیدی در فرآیندهایی مانند Real-Time PCR (qPCR)، کلونینگ ژنی، و آنالیز بیان ژن می‌باشد.

شناسه

N/A

برچسب:

cDNA / Complementary DNA Synthesis Kit / RNA / کیت سنتز / کیت سنتز cDNA

برند:: امینبیک

شرح

استفاده از cDNA به محققان این امکان را می‌دهد که به طور غیرمستقیم اطلاعات ژنتیکی سلول‌ها را مطالعه کرده و میزان بیان ژن‌های مختلف را تحلیل کنند.

ساختار و اجزای کیت

کیت سنتز cDNA معمولاً شامل مواد زیر است:

ریورس ترانسکریپتاز (Reverse Transcriptase): آنزیمی که RNA را به DNA مکمل تبدیل می‌کند.
میکس بافر (Buffer Mix): برای فراهم کردن شرایط مناسب واکنش.
dNTPs: نوکلئوتیدهای آزاد برای سنتز رشته جدید DNA.
پرایمرها (Primers): مانند Oligo(dT) و Random Hexamers برای شروع سنتز.
کنترل مثبت: در برخی کیت‌ها جهت اطمینان از عملکرد صحیح واکنش.
آب RNase-free: برای رقیق‌سازی و آماده‌سازی نمونه.

بسته به نوع کیت، ممکن است اجزای اضافی مانند RNase Inhibitor یا آنزیم‌های کمکی نیز در دسترس باشند.

خواص و ویژگی‌ها

کارایی بالا: سنتز سریع و مؤثر cDNA از مقدار کم RNA.
سازگاری: مناسب برای انواع RNA استخراج شده از بافت‌ها، سلول‌ها و نمونه‌های بالینی.
طیف وسیع دمایی: آنزیم‌های مقاوم به دمای بالا باعث بهبود عملکرد و حذف ساختارهای ثانویه RNA می‌شوند.
خلوص بالا: بدون آلودگی DNA ژنومی یا RNase.

کاربردها

Real-Time PCR و Quantitative PCR

سنتز cDNA اولین مرحله در اندازه‌گیری کمی میزان بیان ژن‌ها است. پس از تبدیل RNA به cDNA، می‌توان با استفاده از qPCR بیان ژن‌های هدف را دقیقاً ارزیابی کرد.

کلونینگ ژنی

cDNA می‌تواند به عنوان قالبی برای تولید کدون‌های ژنی خاص در فرآیندهای کلونینگ مورد استفاده قرار گیرد.

تحقیقات بر روی بیان ژن

تحلیل‌های مقایسه‌ای بین شرایط مختلف آزمایشگاهی (مثلاً تحت استرس، دارو، یا بیماری) نیازمند سنتز cDNA با کیفیت بالاست.

مطالعات تشخیصی

در تشخیص بیماری‌هایی مانند سرطان، عفونت‌های ویروسی و اختلالات ژنتیکی، بررسی بیان ژن‌های خاص اهمیت ویژه‌ای دارد که مستلزم سنتز دقیق cDNA است.

نگهداری

دمای مناسب: اغلب اجزای کیت باید در دمای -۲۰ درجه سانتی‌گراد نگهداری شوند.
دوری از چرخه‌های فریز و ذوب مکرر: باعث کاهش کیفیت عملکرد آنزیم‌ها می‌شود.
محیط عاری از RNase: تمامی فرآیندها باید در محیطی انجام شوند که عاری از آنزیم‌های تخریب‌کننده RNA باشد.

نکات ایمنی و فنی

استفاده از تجهیزات و مواد RNase-free برای جلوگیری از تخریب RNA ضروری است.
از لباس محافظ (دستکش، روپوش آزمایشگاهی) برای جلوگیری از آلودگی نمونه‌ها استفاده شود.
دقت در مراحل اولیه آماده‌سازی می‌تواند کیفیت نهایی سنتز cDNA را به شدت تحت تأثیر قرار دهد.

کیت سنتز cDNA ابزاری حیاتی برای محققان حوزه ژنتیک، بیولوژی مولکولی و پزشکی است. انتخاب یک کیت با کیفیت بالا، با آنزیم‌های قوی و پرایمرهای دقیق، تضمین‌کننده‌ی موفقیت در آزمایش‌های بعدی مانند qPCR و کلونینگ خواهد بود. اگر به دنبال عملکرد بالا و نتایج تکرارپذیر هستید، انتخاب کیت سنتز cDNA مناسب گامی کلیدی در پروژه‌های تحقیقاتی شما خواهد بود.