فلاسک کشت سلول
فلاسک کشت سلول در جهت انجام انواع آزمایش های کشت سلولی مناسب می باشند که در اندازه های مختلف و از جنس پلی استایرن می باشند.
شرح
فلاسک کشت سلول یکی از لوازم مهم آزمایشگاهی است که همواره در اکثر آزمایشگاه‌ها مورد استفاده قرار می‌گیرد. بسیاری از سلولهای یوکاریوت ها و پروکاریوت ها را می‌توان در خارج از بدن حیوانات تکثیر داد. سلولهای جدا شده از بافت‌ها و اعضای بدن حیوانات می‌توانند در دمای مناسب مناسب و در یک محیط حاوی مواد غذایی و عوامل رشد درون ظروف پلاستیکی رشد کنند.
کشت اعضاء، بافت و سلولهای جانداران در محیط آزمایشگاهی را کشت سلولی می‌نامند که کاربردهای متنوعی در شاخه‌های مختلف علوم زیستی دارد و در انجام بسیاری از پروژه های تحقیقاتی بر سلول های جانوری برای بررسی آنزیم ها، اسیدهای نوکلئیک، آنتی بادی ها و مسیرهای بیوشیمیایی استفاده می شود. برای انجام این نوع از کشت‌ها نیازمند انواع ظروف کشت سلول هستیم.
امروزه تولید بعضی از محصوات بیولوژیک نظیر تولید بعضی از واکسن‌ها و تولید آنتی بادی‌های مونوکلونال منحصرا به کمک تکنیک کشت سلولی امکان پذیر است. کشت سلولی کاربردهای اختصاصی‌تری نیز دارد؛ به همین دلیل انتخاب فلاسک یا پلیت کشت مناسب برای راحتی کاربر، دستیابی به تعداد مناسب سلول و کمترین میزان آلودگی سلول ها بسیار اهمیت دارد.
انواع فلاسک کشت سلول
فلاسک های کشت سلول را می‌توان بر اساس نوع سلول باکتری، جانوری و گیاهی، هدف کشت سلول، تعداد سلولهای مورد نیاز پس از کشت، نوع محیط کشت و چسبندگی یا معلق بودن سلول، به انواع مختلفی تقسیم کرد. فلاسک مسطح، فلاسک اسپینر و فلاسک‌های ارلن مایر انواع متدوال این ابزارهای کشت سلولی هستند که در اندازه‌های متفاوت تولید می‌شوند. سطح داخلی این فلاسک‌ها بر اساس کاربرد مورد نظر به وسیله مولکول های زیستی(ازجمله کلاژن) یا شیمیایی پوشیده می‌شود.
۱- فلاسک کشت سلول مسطح
این فلاسک‌ها یکی از متدوال‌ترین انواع ظرف کشت سلولهای جانوری هستند. در طراحی این فلاسک‌ها گردنی در نظر گرفته شده است که به شما این امکان را می‌دهد به راحتی محیط کشت را به فلاسک انتقال دهید. شکل این فلاسک‌ها شبیه حرف انگلیسی است به همین دلیل با توجه به حجم محیط کشتی که در خود جای می‌دهند به انواع T25، T75، T175، T225 و T300 تقسیم می‌شوند.
تقسیم‌بندی این فلاسک‌ها بر اساس مساحت سطح دسترس برای کشت سلول است. برای مثال مساحت در دسترس برای کشت سلول در فلاسک‌های تی ۲۵، ۲۵ سانتی‌متر مربع است. فلاسک‌های T، پرکاربردترین فلاسک‌های کشت سلولهای جانوری هستند. بر اساس نوع سلول و سرعت تکثیر آن می‌توان از فلاسک‌های مختلف استفاده کرد.
۲- فلاسک کشت سلول چندلایه
فلاسک‌های چندلایه از به دو نوع مسطح و دایره‌ای تقسیم می‌شوند. شکل فلاسک‌های چندلایه مسطح با فلاسک‌های تک‌لایه تفاوتی ندارد. اما فضای اصلی آن‌ها به چند بخش مختلف تقسیم می‌شود که مساحت در دسترس برای کشت سلول را افزایش می‌دهد. با استفاده از این فلاسک می‌توانی همزمان چند نمونه سلولی را در یک ظرف کشت دهید.
۳- اسپینر
این فلاسک‌ها بخشی از سیستم‌های بیوراکتوری هستند که برای کشت سلول‌ها در محیط مایع از آن‌ها استفاده می‌شود. فلاسک اسپینر ظرفی استوانه‌ای از جنس شیشه یا پلیمرهای خنثی است که در دو طرف لوله‌های اتصالی به بخش اصلی دستگاه قرار دارد. این فلاسک‌ها بیشتر برای کشت سلول‌ها در مقیاس صنعتی استفاده می‌شود و حجم آن‌ها بین ۱۰۰ تا ۱۰۰۰ میلی‌لیتر محیطی است.
۴- فلاسک کشت سلولی با دیواره متحرک
خارج کردن سلولهای بنیادی، استخوانی و بافت از فلاسک‌های کشت معمولی دشوار است و ممکن است با آسیب بافت کشت شده همراه باشد. همچنین استفاده از پتری‌دیش یا پلیت‌های بدون در، احتمال آلودگی‌های محیطی را افزایش می‌دهد. این فلاسک‌ها برای دسترسی راحت به سلول کشت شده طراحی شده‌اند. این فلاسک‌ها شبیه فلاسک‌های مسطح هستند با این تفاوت که یکی از دیواره‌های آن را می‌توان جدا کرد. این فلاسک‌ها در کشت بافت و داربست‌های سلولی کاربرد فراوانی دارند و پس از تشکیل داربست یا کامل شدن رشد بافت می‌توان با برداشت دیواره سلیفونی به راحتی و بدون آسیب فیزیکی بافت را خارج کرد
۵- فلاسک کشت سول اتوماتیک
در کشت سلولی اتوماتیک بخشی یا همه فرایندهای کشت سلول به‌وسیله دستگاه‌های اتومات و برنامه‌ریزی شده انجام می‌شود. به همین دلیل اندازه و شکل فلاسک‌های این نوع کشت متناسب با مهندسی دستگاه تغییر کرده است. فلاسک کشت سلولی که در این روش استفاده می‌شود معمولا مستطیلی با قطر بسیار کمتر از فلاسک‌های مسطح است. به علاوه برآمدگی فلاسک‌های مسطح در این ظرف‌ها حذف شده است.
۶- پتری دیش
برای کشت سلولهای باکتریایی معمولا از پتری‌دیش یا لوله های آزمایش استفاده می‌شود. پتری‌دیش ظرفی دایره‌ای از جنس شیشه یا پلیمرهای خنثی است که می‌توان آن را در انکوباتورهای کشت سلولی قرار داد. از این ظرف‌ها می‌توان برای محیط کشت‌های جامد استفاده کرد. لوله آزمایش یکی از پرکاربردترین ابزارهای آزمایشگاه زیست و شیمی است که بیشتر برای محیط کشت‌های مایع و نیمه‌جامد باکتری از آن استفاده می‌شود.
انواع پوشش سر فلاسک
دو نوع پوشش سر یا کَپ در فلاسک‌های کشت سلولی وجود دارد. کَپ مهروموم و بدون منفذ برای روش‌های کشت سلولی است که محیط کشت باید کاملا از محیط اطراف جدا باشد. پوشش سر منفذدار را می‌توان برای کشت سلول‌هایی استفاده کرد که به اکسیژن بیشتر محیط نیاز دارند. منفذ این درها با فیلتری سیار نازک به قطر ۲ میکرومتر پوشیده شده است تا از ورود آلودگی‌های محیطی جلوگیری کند.
نحوه کار با فلاسک کشت سلول
پس از انتخاب فلاسک مناسب با توجه به نوع سلول و نوع محیط کشت مناسب آن، برای جلوگیری از هر گونه آلودگی احتمالی محیط کشت استریل را به وسیله پپیت استریل با حجم مناسب و زیر هود لامینار به فلاسک اضافه کنید.حجم کامل هر فلاسک را می‌توان از حاصلضرب مساحت سطح دیواره در فاصله بین دو دیواره محاسبه کرد. اما برای کشت سلولی نیاز نیست تمام فلاسک را پر کنید. فقط کافیست حجمی از محیط کشت به فلاسک اضافه کنید که بین ۰٫۲ تا ۰٫۵ سانتی‌متر از ارتفاع آن را پر می‌کند.
اطلاعات تکمیلی
| بسته بندی | 1بسته10تایی, 1بسته5تایی |
|---|---|
| مدل | T25, T75 |
| نوع درب | چسبنده, فیلتردار |
